小龙虾的卵巢发育持续时间较长，通常在交配以后，视水温不同，卵巢需再发育2-5个月方可成熟。在生产上，小龙虾苗可从头胸甲与腹部的连接处进行观察，根据卵巢的颜色判断性腺成熟程度，把卵巢发育分为苍白、黄色、橙色、棕色（茶色）和深棕色（豆沙色）等阶段。其中苍白色是未成熟幼虾的性腺，细小，需数月方可达到成熟；橙色是基本成熟的卵巢，交配后需3个月左右可以排卵；茶色和棕黑色是成熟的卵巢，是选育亲虾的理想类型。精巢较小，在养殖池塘中，一般同卵巢同步成熟。在各主要的螯虾生产区域，一般采用逐步排干池水的方法，来刺激螯虾的性腺成熟，促进亲虾交配产卵。
小龙虾可常年交配，但以每年春季为高峰。交配一般在水中的开阔区域进行，交配水温幅度较大，从15℃到31℃均可进行。在交配时，雄虾通过交合刺将精子注入雌蟹（虾）的纳精囊中，精子在纳精囊中贮存2-8个月，仍可使卵子受精。雌虾在交配以后，便陆续掘穴进洞，当卵成熟以后，在洞穴内完成排卵、受精和幼体发育的过程。
